Ответ:

Секвенирование — это определение порядка нуклеотидов в молекуле ДНК. Один из классических способов — метод обрыва цепи.

  1. Исследуемую ДНК разделяют на цепи и используют одну из них как матрицу.
  2. ДНК-полимераза синтезирует комплементарные цепи. В реакционную смесь добавляют обычные нуклеотиды и меченые дидезоксинуклеотиды, включение которых прекращает удлинение цепи.
  3. Получаются фрагменты разной длины, заканчивающиеся мечеными нуклеотидами.
  4. Фрагменты разделяют по длине электрофорезом и считывают метки от коротких фрагментов к длинным, восстанавливая последовательность.

Схема принципа метода:

Матрица ДНКСинтез и обрыв цепейРазделение фрагментов3′—A C G T—5′5′—T G*5′—T G C*5′—T G C A*короткиедлинные* — метка/терминирующий нуклеотид; схематическое изображение